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LZCap®AG(3'Ma-Biotin)

货号 HN3008
分子式

C43H60N18O25P4S(游离酸)

分子量 1385.01(游离酸)
纯度 HPLC≥90%
浓度 25mM
规格 50 μL、100 μL
盐型 NH4+
保存 -20°C及以下保存


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LZCap® AG(3'Ma-Biotin)是一种Cap1类似物,带有一个Biotin标记,可以作为mRNA共转录加帽试剂,在T7聚合酶作用下,利用LZCap® AG(3'Ma-Biotin)、NTPs以及模板DNA共转录产生带5’端Cap 1结构的mRNA,加帽后的mRNA能直接在细胞和体内翻译表达,具有优秀的表达效率。LZCap® AG(3'Ma-Biotin加帽的mRNA,具有Biotin标记,可以与链霉素磁珠结合,对多种生物学功能进行探索。

分子式:C43H60N18O25P4(游离酸)

分子量:1385.01(游离酸)

CAS号:/

浓  度:25 mM

规  格:50 μL、100 μL

纯  度:HPLC ≥90%

盐  型:NH4+

结  构:

HN3008-2.png

保存:-20°C及以下保存。

LZCap®的DNA模板设计

LZCap® AG(3'Ma-Biotin)适用于AG起始的序列,T7启动子(下划线)后接AG序列能够有效起始转录。

AG模板设计.png

实验流程

1. 在冰上解冻实验所需的组分。

2. 参考以下反应体系室温配置转录体系。

HN3008-1.png

为了进一步降低mRNA的免疫原性,恒诺康还可以为您提供修饰核苷酸N1-Me-pUTP(N1-甲基假尿苷三磷酸)(货号:HN1002)用来代替UTP参与转录反应。

备注:

1)     LZCap®  AG(3'Ma-Biotin)适用于以5’AG 3’起始序列的T7启动子转录载体,在载体构建时需要加以考虑。

2)     实验所用的试剂耗材和容器等无RNase污染。

3)     建议使用线性化的DNA模板进行转录。

4)     使用修饰核苷酸代替野生型核苷酸时,反应终浓度不变。

5)     若使用PCR产物作为转录起始模板,DNA模板量可以减少一半。

3. 将配置好的反应液混匀,短暂离心后,置于37℃孵育2-3小时。若转录本长度小于 100nt,增加反应时间至 4-8 h。