LZCap®AG(3'Acm)
| 货号 | HN3004 |
| 分子式 | C35H48N16O24P4（游离酸） |
| 分子量 | 1200.75（游离酸） |
| 纯度 | HPLC≥95% |
| 浓度 | 100mM |
| 规格 | 100 μL、1 mL |
| 盐型 | NH4+盐 |
| 保存 | -20°C及以下保存 |
产品描述：LZCap®AG(3'Acm)是一种Cap1类似物，可以作为mRNA共转录加帽试剂，在T7聚合酶作用下，利用LZCap®AG(3'Acm)、NTPs以及模板DNA共转录产生带5’端Cap 1结构的mRNA，加帽后的mRNA能直接在细胞和体内翻译表达。广泛应用于体外转录、基因编辑、疫苗研发、肿瘤CAR-T治疗、蛋白代替疗法以及再生医学等领域。
LZCap®AG(3'Acm)需要T7启动子以AG作为起始序列，LZCap®AG(3'Acm)的加帽率可达97%，1μg起始模板量转录产生100-200μg mRNA。
分子式：C35H48N16O25P4（游离酸）
分子量：1200.75（游离酸）
CAS号：/
浓 度：100 mM
规 格：100 μL、1 mL
纯 度：HPLC ≥95%
盐 型：NH4+
结 构：
保存：-20°C及以下保存。
LZCap®的DNA模板设计
LZCap® AG适用于AG起始的序列，T7启动子（下划线）后接AG序列能够有效起始转录。
实验流程
1． 在冰上解冻实验所需的组分。
2． 参考以下反应体系室温配置转录体系。
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
ATP(100mM) |
1 |
5mM |
UTP(100mM) |
1 |
5mM |
CTP(100mM) |
1 |
5mM |
GTP(100mM) |
1 |
5mM |
LZCap® AG(3'Acm) (100mM) |
0.8 |
4mM |
10×Transcription Buffer |
2 |
1× |
Recombinant RNase Inhibitor(40U/μL) |
0.5 |
1U/μL |
Pyrophosphatase(0.1U/μL) |
0.4 |
0.002U/μL |
T7 RNA polymers(250U/μL) |
0.64 |
8U/μL |
Linear DNA+RNase Free Water |
11.66 |
1μg |
终体积 |
20μL |
|
为了进一步降低mRNA的免疫原性，恒诺康还可以为您提供修饰核苷酸N1-Me-pUTP（N1-甲基假尿苷三磷酸）（货号：HN1002）用来代替UTP参与转录反应。
备注：
1) LZCap® AG (3'Acm)适用于以5’AG 3’起始序列的T7启动子转录载体，在载体构建时需要加以考虑。
2) 实验所用的试剂耗材和容器等无RNase污染。
3) 建议使用线性化的DNA模板进行转录。
4) 使用修饰核苷酸代替野生型核苷酸时，反应终浓度不变。
5) 若使用PCR产物作为转录起始模板，DNA模板量可以减少一半。
3． 将配置好的反应液混匀，短暂离心后，置于37℃孵育2-3小时。若转录本长度小于 100nt，增加反应时间至 4-8 h。